分享一篇发表在JACS上的文章，题目为：Click Chemistry-Assisted Rejuvenation of Aging T Cells Sensitizes Aged Mice to Tumor Immunotherapy. 本文通讯作者是武汉大学的张先正教授和程巳雪教授，张教授的研究方向是生物医用高分子，主要针对恶性肿瘤等重大疾病诊断的难点，在生物医用高分子领域开展系统、深入的研究。程教授的研究方向包括生物医用高分子，药物及基因传递材料和生物材料的自主装。

老龄化被视为肿瘤发生的主要风险因素，因为大多数恶性肿瘤的发病率随年龄增长而显著上升。作者通过TCGA数据库分析发现，老年人肿瘤内表达的PD-1显著高于年轻患者，而且PD-1表达量越高，病人预后越差，作者的小鼠实验结果也显示，老年小鼠肿瘤中的PD-1表达量显著高于年轻小鼠。雷帕霉素被报道对小鼠和人类的免疫老化均有益处，作者用10 ng/mL的雷帕霉素处理老年小鼠肿瘤来源的CD8+ T细胞，可显著抑制其PD-1的表达。

然而，将雷帕霉素精确靶向递送至老化T细胞仍然是一个重大挑战，目前已报道的制备雷帕霉素的纳米载体尺寸均超过50 nm，研究表明，如果想通过组织间隙进入淋巴系统，同时避免被吞噬细胞摄取的最佳颗粒尺寸需要在20-50 nm。

为了靶向递送雷帕霉素，本研究中，作者采用聚合物胶束（PLA-PEG）来实现雷帕霉素向肿瘤引流淋巴结（简称TdLNs ，tumor-draining lymph nodes）的递送。作者首先摸索了PLA-PEG与雷帕霉素的摩尔比，发现在25：2时达到最佳平衡，可以在72 h内在盐水中释放53.6%的雷帕霉素，体外实验表明，该纳米颗粒可显著降低老年肿瘤小鼠体外CD8+ T细胞上的PD-1的表达，其效果与游离的雷帕霉素相当。

为进一步增强雷帕霉素在TdLNs中的积累，作者利用生物正交反应对递送系统进行功能化，作者将PLA-PEG胶束修饰为DBCO，使其与预先插入TdLNs的DSPE-PEG-N3进行点击化学反应，DSPE作为一种获准用于人体的磷脂聚合物，已有报道利用其双酰基脂尾搭载白蛋白运输至引流淋巴结(DLNs)，随后转位插入DLNs的细胞膜。作者首先用FITC替代N3作为荧光标记进行可视化，结果显示，DSPE-PEG-FITC的荧光信号能在淋巴结中持续超过72 h。且DSPE-PEG-N3显著增加了PAG-DBCO胶束在淋巴结中的积累，这些结果表明，DSPE-PEG-N3能够到达淋巴结，从而可能作为诱饵增加PAG-DBCO在TdLNs中的积累。

最后，作者评估了TdLNs递送系统促进αPD-L1抗肿瘤效果的能力，αPD-L1联合PAG-DBCO胶束治疗显著抑制老年小鼠的肿瘤进展，但对年轻小鼠无显著差异。

总之，作者开发了一种靶向递送系统，能够有效促进雷帕霉素在肿瘤引流淋巴结中的积累，该系统不仅能降低PD-1表达，还能抑制TdLNs和肿瘤微环境中CD8+ T细胞的衰老，为老年肿瘤患者的特定免疫治疗策略提供了新的见解。

本文作者：YSL

责任编辑：LZ

DOI：10.1021/jacs.5c05312

原文链接：https://doi.org/10.1021/jacs.5c05312