生物素修饰

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客户定制产品发表文章示例(生物素系列):
1、Chlorogenic acid ameliorated non-alcoholic steatohepatitis via alleviating hepatic inflammation initiated by LPS/TLR4/MyD88 signaling pathway
Gu, Xinnan; Wei, Mengjuan; Hu, Feifei;Ouyang, Hao; Huang, Zhenlin; Lu, Bin; Ji, Lili [Chemico-Biological Interactions, 2023, vol. 376, art. no. 110461]

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S000927972300128X?via%3Dihub

例如:生物素-紫草素,生物素-羟基喹啉衍生物,生物素-谷维素,生物素-苦参碱,生物素-熊果素,生物素-陈皮素,生物素-紫花前胡苷,生物素-毛蕊异黄酮,生物素-聚赖氨酸,生物素-莪术醇,生物素-千层指素,生物素-青蒿素,生物素-去氧陈皮素,生物素-猪去氧胆酸,生物素-绿原酸。。。。

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生物素理化性质:


中文名称:D-生物素,英文名称:D-Biotin,CAS号:58-85-5,分子式:C10H16N2O3S,分子量:244.31  ,熔点231-233°C(lit.)


比旋光度89º(c=1,0.1NNaOH),沸点573.6±35.0°C(Predicted),密度1.2693(roughestimate),折射率90.5°(C=2,0.1mol/LNaOH),储存条件-20°C


水溶解性SolubleChemicalbookinhotwater,dimethylsulfoxide,alcoholandbenzene.


敏感性LightSensitive


稳定性Stable,butlightsensitive.Incompatiblewithstrongoxidizingagents,strongbases,strongacids,formaldehyde,chloramine-T,nitrousacid.


生物素标记的优点:


  生物素是动、植物体内广泛分布的一种小分子生长因子,又名辅酶R或维生素H,其难溶于水,易溶于二甲基甲酰胺。生物素可与亲和素(动物微生物中提取的一种含10%碳水化合物的碱性糖蛋白)或链霉亲和素(链球菌属的菌培养液中提取的一种蛋白质)紧密特异结合,进一步形成一种新的生物扩增系统:生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS)。生物素具有快速,特异性好和低分子量(MW=244.31 g/mol)等优点,并且不影响分子的天然功能。


生物素标记具有亲和力高和多级扩增的优势,并且可与免疫荧光技术结合,如荧光素,酶和同位素等等。它是许多生物医学研究的有效工具,如各种示踪免疫测定,免疫标记,蛋白质标记,分子杂交和核酸探针标记。其中,核酸杂交技术广泛应用于医学科学研究和临床医学,但在应用于核酸探针之前,必须使用同位素或生物素标记。同位素标记探针具有非常短的半衰期并且对人的健康有害,而生物素标记更稳定,准确和方便,可用于各种检测系统,同时也可以避免放射性同位素对人体造成的伤害。


BAS在实际应用中所具有的巨大优越性,主要表现在以下几个方面。

灵敏度

生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。

特异性

亲和素与生物素间的结合具有极高的亲和力,其反应呈高度专一性。因此,BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时,并不增加非特异性干扰。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可最大限度地降低反应试剂的非特异作用。

稳定性

亲和素结合生物素的亲和常数可为抗原-抗体反应的百万倍,二者结合形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此,BAS在实际应用中,产物的稳定性高,从而可降低操作误差,提高测定的精确度。

普适性

生物素-亲和素系统的多功能性还能提供一套统一的研究方法。例如对于某待测分子,已经得到了对于该分子的生物素标记抗原,那么配合结合亲和素的胶体金可以在电镜下观测,配合结合荧光标记的亲和素可以使用流式细胞仪筛选,配合连接到酶的亲和素可以进行ELISA等免疫组化实验。

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