在原核生物中，许多参与核糖体合成和翻译后修饰肽（RiPP）生产的生物合成酶通常具有两个不同的功能部分：（1）RiPP前体肽识别元件（RRE）和（2）催化结构域。前者与双向前体肽的保守前导部分结合，而后者修饰核心肽中的特定序列。这使得酶具有特异性，但会混杂地作用于具有不同核心序列的前体肽。有鉴于此，University of North Carolina at Greensboro的Jonathan R. Chekan组利用这一生物学原理，通过将细菌N-糖基转移酶（NGT）重组连接到RRE设计融合酶解决了酶的特异性问题。

图片来源：ACS Catal.

此外，这项研究还设计了导向（有前导肽）和非导向（无前导肽）底物来评估融合酶的催化性能。与野生型酶相比，嵌合系统提高了融合酶对某些导向底物的催化效率以及体外和体内选择性。

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最后，为了证明这一工程酶的实用性，用融合酶生产了glycocin sublancin的N-糖基化类似物具有抗菌效果。总的来说，这项工作说明了将蛋白质翻译后修饰酶转化为设计工具的可行性，该工具可用于为RiPP天然产物和其他肽引入新的化学修饰。

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原文标题：Targeted Peptide Modification Using an Engineered Bacterial N‑Glycosyltransferase

原文作者：Ayoola B. Smith and Jonathan R. Chekan*

ACS Catal. 2024, 14, 12875−12883